端粒是真核細(xì)胞線性染色體末端特異的DNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物。在人類，端粒的DNA重復(fù)序列為5'TTAGGG3'，因?yàn)镈NA的不完全復(fù)制，細(xì)胞每分裂一次，染色體末端的端粒長度(TL)可以縮短50～200bp，當(dāng)TL縮短到某一閾值時，細(xì)胞便進(jìn)入了復(fù)制衰老�？梢�，TL對于維持基因組的完整性和穩(wěn)定性具有重要意義，同時也說明隨著年齡的增加，TL不可避免的縮短。同一個體不同細(xì)胞間的TL具有較高的異質(zhì)性，年齡相同的不同個體間TL也明顯不等。TL明顯受遺傳因素影響。然而，子代TL受其父親或母親TL的影響有不同的報道。本研究擬分析家系中子代白細(xì)胞TL(LTL)與其父母LTL的相關(guān)性，以確定該群體LTL的遺傳模式。

1材料與方法

1.1對象

廣西巴馬地區(qū)(巴馬、東蘭、鳳山、都安)的健康壯族長壽家系，共403個家系1422人。其中第一代共420人，男114人，女306人，年齡54～106歲，平均(91.03±6.47)歲;第二代共589人，男443人，女146人，年齡26～76歲，平均(56.32±8.34)歲;第三代共413人，男266人，女147人，年齡5～56歲，平均(26.63±10.87)歲，見表1。所有受試對象于采樣前常規(guī)進(jìn)行問診及體格檢查，均無心、腦血管藥物服用史，基本排除糖尿病、高血脂、高血糖、高血壓、冠心病、中風(fēng)等老年相關(guān)性疾病，屬于健康個體。

1.2方法

1.2.1血液標(biāo)本的采集與處理所有受試者晨起空腹，采集肘靜脈外周血2ml于存有EDTA的抗凝管中，凍存?zhèn)溆谩?

1.2.2外周血基因組DNA的提取用經(jīng)典苯酚/氯仿法提取DNA，-20℃保存?zhèn)溆谩?

1.2.3real-timePCR方法測定LTLLTL測定所需的引物及反應(yīng)條件詳見文獻(xiàn)。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS16.0統(tǒng)計學(xué)分析軟件，經(jīng)P-P檢驗(yàn)，LTL資料分布為正態(tài)分布，組間差異性比較應(yīng)用t檢驗(yàn)及協(xié)方差(年齡為控制變量)分析，相關(guān)性分析應(yīng)用偏相關(guān)(年齡、性別為控制變量)或直線相關(guān)分析。

應(yīng)用在線軟件VassarStats〔(Lowry1998-2008)，http://faculty.vassar.edu/lowry/VassarStats.html.〕對母親-子女及父親-子女間的相關(guān)系數(shù)進(jìn)行比較。

2結(jié)果

2.1各代人群的年齡、性別分布及相應(yīng)的LTL看出子代群體中女性LTL明顯長于男性(P<0.05)。而家系中其他代人的LTL并無性別差異。

2.2LTL與年齡的相關(guān)性無論是總體人群或是性別分層后，均顯示LTL與年齡呈明顯的負(fù)相關(guān)性，即隨年齡的增加，LTL逐漸縮短。

2.3LTL的遺傳模式子代LTL與其父母LTL呈正相關(guān)(r=0.486，P=0.000);兒子、女兒LTL既與母親LTL又與父親LTL呈正相關(guān)。在線軟件VassarStats的Z檢驗(yàn)結(jié)果(Z=0.74，P=0.46)說明母親LTL對子女LTL的影響與父親LTL對子女LTL的影響是相同的。為進(jìn)一步了解LTL的可遺傳性，將家系中第一代人即父代與其孫輩的LTL進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果顯示，祖父母與其孫子女之間LTL呈正相關(guān);祖父或祖母與孫子女之間LTL均呈正相關(guān)。

2.4子代LTL與其出生時父輩年齡的關(guān)系家系中子代LTL與其出生時父親、母親年齡沒發(fā)現(xiàn)有相關(guān)性。

3討論

端粒是位于染色體末端的特殊結(jié)構(gòu)，保護(hù)染色體免受損害。TL隨細(xì)胞分裂而進(jìn)行性縮短，其縮短速率在不同類型細(xì)胞有所不同，但均與年齡呈負(fù)相關(guān)性，即隨年齡增加而進(jìn)行性縮短。本研究顯示，在總體人群及性別分層后，LTL均隨年齡的增大而縮短，與其他學(xué)者的報道一致。另外，子代人群中女性的LTL明顯長于男性，與Ahola等的報道一致。Nawrox等在2004年報道TL的遺傳模式研究，認(rèn)為TL遵循X-連鎖遺傳，因?yàn)樽哟鶷L與其母親TL呈正相關(guān)，女兒TL既與母親TL又與父親TL呈正相關(guān)，而兒子TL只與母親TL呈正相關(guān)與其父親的TL無相關(guān)性，認(rèn)為可能與X染色體上DKC1基因的多態(tài)性有關(guān)。后者可以編碼影響人類端粒酶RNA成分(hTERC)的dyskerin蛋白。當(dāng)DKC1基因錯義突變時可引起X-連鎖的先天性角化不良病人細(xì)胞中的hTERC濃度下降，使端粒酶活性降低，進(jìn)而使TL縮短。本研究也發(fā)現(xiàn)，子代LTL遵循母系遺傳模式，即在母親-子女、母親-兒子、母親-女兒間LTL呈明顯的正相關(guān)性，說明母親LTL越長，遺傳給兒子或女兒LTL越長。另外，我們還發(fā)現(xiàn)LTL也呈父系遺傳模式，即父親-子女、父親-兒子、父親-女兒間LTL亦呈明顯的正相關(guān)性，說明父親LTL越長，遺傳給兒子或女兒的LTL越長，與Njajou等和Nordfjll等的報道一致。我們進(jìn)一步想了解到底母系或是父系遺傳模式對子代LTL的影響更大，然而Z檢驗(yàn)的結(jié)果卻表明在我們的研究群體中母系及父系遺傳模式對子代LTL的影響是相同的，與Broer等對19713名個體進(jìn)行的Meta分析顯示的“TL遵循較強(qiáng)的母系遺傳”有所差異，可能是種族、樣本量等方面不同所致。

LTL的可遺傳性不僅表現(xiàn)在父代與子代之間。本研究中家系的第一代人(父代)LTL與其孫子女LTL的相關(guān)性分析表明孫子女LTL與其祖父、母的LTL呈現(xiàn)明顯的正相關(guān)關(guān)系，說明LTL的遺傳可以超越兩代人，可進(jìn)一步證明遺傳因素對LTL的作用，與Nordfjll等的報道一致。

Broer等還指出，子代TL與其出生時父親的年齡呈正相關(guān)。然而，本研究中并沒發(fā)現(xiàn)這一結(jié)論。新生兒的LTL可以反映其父輩遺傳因素對其LTL的影響，但在生后的成長過程中不可避免地受到各種環(huán)境因素的作用，而環(huán)境因素對TL的影響已有不少報道，如吸煙等。因此，研究子代TL與其出生時父親、母親年齡的關(guān)系可能還需要考慮其他環(huán)境混淆因素對結(jié)果的干擾。